| 适用范围 | 试剂 |
|---|---|
| 使用方法 | （一）配制即用型冻存液 1. 取新鲜外周血（枸橼酸钠抗凝），300g，离心10min。 2. 自体血浆制备： （1）取上半部分2/3的血浆层，放入50ml离心管中，56℃，灭活30min （2）取出离心管，放入-20℃静置10min （3）取出离心管，4℃，1100g，离心15min （4）取出上面部分澄清血浆层，放入新50ml离心管中 3. 即用型冻存液配制：灭活后血浆：冻存液按照1:4比例混合，即可成即用型冻存液。（例： 800ul冻存液加200ul灭活血浆） （二）细胞冻存及复苏 1. 人外周血单个核细胞收集 取新鲜人外周血，使用枸橼酸钠抗凝后，离体2h内做PBMC分离，参照样本密度分离液 操作规程分离获得。 2. 细胞冻存 将收集的PBMC用细胞保存液重悬，使其浓度为1*107/ml（可根据实际实验需求进行调 整）。分装至冻存管中，每管1ml，放置于程序降温盒中缓慢降温24h，然后置于液氮中 长期保存。 3. 细胞复苏 （1） 将水浴锅温度调至37℃，取出冻存管快速置于水浴锅内，晃动冻存管直至管中冻存细 胞融化； （2） 将溶化的细胞冻存悬液转移至含有5-10倍体积完全培养基的离心管中，轻轻混匀； （3） 室温300g离心10min；去除上清液，加入已回温的完全培养基重悬细胞，进行细胞计 数，根据计数结果，取适量的细胞悬液接种到新的培养瓶内； （4） 将复苏好的细胞转移至37℃，5% CO2培养箱中，按常规方法培养。 |
| 注意事项 | 1. 试剂包装如有破损或滴漏，严禁使用。 2. 请遵守严格无菌的工作规范，操作过程避免污染。 3. 使用前应详细阅读使用说明书，在有效期内使用。 4. 该冻存液为非即用型冻存液，如果配制成即用型冻存液必须冷冻保存。 |
| 声明 | 仅用于科研使用，不能用于临床诊断和治疗。 |
| 保存条件 | 2°C-8°C避光保存，有效期18个月； |
BDBIO PBMC/NK专用冻存液是一款专门针对血液来源的PBMC及脐血干细胞冻存而设计的 非即用型冻存液，本产品无血清，无其他异源成分，使用前需添加灭活自体血浆使用，达到 高安全性。
